分光光度計(jì)是理化分析中zui常用的儀器。它的基本原理是建立在光與物質(zhì)相互作用的基礎(chǔ)上，當(dāng)光子和某一溶液中吸收輻射的物質(zhì)分子相碰撞時(shí)，就發(fā)生吸收，測(cè)量其吸光度值的大小可反映某種物質(zhì)存在的量的多少。光的吸收程度與濃度有一定的比例關(guān)系，這就是的比直定律。該定律成立的必要條件是單色光（單一波長(zhǎng)光）照射樣品。為了使該定律具有良好的線性，對(duì)測(cè)量濃度有一定的范圍要求。
分光光度計(jì)作為一種精密儀器，在運(yùn)行工作過(guò)程中由于工作環(huán)境，操作方法等種種原因，其技術(shù)狀況必然會(huì)發(fā)生某些變化，可能影響設(shè)備的性能，甚至誘發(fā)設(shè)備故障及事故。因此，分析工作者必須了解分光光度計(jì)的基本原理和使用說(shuō)明，并能及時(shí)發(fā)現(xiàn)和排除這些隱患，對(duì)已產(chǎn)生的故障及時(shí)維修才能保證儀器設(shè)備的正常運(yùn)行。
1、使用的吸收池必須潔凈，并注意配對(duì)使用。量瓶、移液管均應(yīng)校正、洗凈后使用。
2、取吸收池時(shí)，手指應(yīng)拿毛玻璃面的兩側(cè)，裝盛樣品以池體的4/5為度，使用揮發(fā)性溶液時(shí)應(yīng)加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應(yīng)無(wú)溶劑殘留。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈，晾干防塵保存。
3、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之間為宜。
4、測(cè)定時(shí)除另有規(guī)定外，應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對(duì)照，采用1cm石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰±2nm以內(nèi)，測(cè)幾個(gè)點(diǎn)的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長(zhǎng)附近自動(dòng)掃描測(cè)定，以核對(duì)供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度zui大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)，除另有規(guī)定外吸收度zui大波長(zhǎng)應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的測(cè)定波長(zhǎng)±2nm以內(nèi)。
6、供試品應(yīng)取2份，如為對(duì)照品比較法，對(duì)照品一般也應(yīng)取2份。平行操作，每份結(jié)果對(duì)平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。
7、選用儀器的狹縫寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度值會(huì)偏低，狹縫寬度的選擇應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)，對(duì)于大部分被測(cè)品種，可以使用2nm縫寬。
分光光度計(jì)是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室*的設(shè)備，它常用來(lái)測(cè)定生物樣品中的核酸、蛋白和細(xì)胞。目前，分光光度計(jì)已被大范圍應(yīng)用在治藥、治金、醫(yī)藥、食品工業(yè)、化工、衛(wèi)生、學(xué)校、石油化工、生物化學(xué)、環(huán)境保護(hù)、質(zhì)量控制及科研實(shí)驗(yàn)室做化學(xué)分析。
